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EndoS endoglycosidase
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QPF-011-A
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QPF-011-B
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产品概述

背景:

       EndoS是一种IgG高特异性糖苷内切酶,水解切割IgG Fc段糖基上N-聚糖的壳二糖核心中间的β-1,4糖苷键,释放糖链,从而在糖蛋白的Asn残基上留下含有或不含有核心岩藻糖的GlcNAc(N-乙酰葡糖胺)。

       Rhinogen® EndoS endoglycosidase是利用E.coli表达系统生产并经过多步层析纯化得到的重组EndoS糖苷酶。其含有His标签,在酶切完成后很容易从酶切反应体系中分离去除。对所有类型的N-糖链都能有效酶切,包括高甘露糖型、杂合型及复杂型。可作用于人所有IgG,及小鼠、大鼠、猴、山羊、绵羊、牛、马的IgG抗体糖基。

产品包装:

       Rhinogen® EndoS endoglycosidase包装规格如下:

                 目录号
             规格
             QPF-011-A
          1000U
             QPF-011-B
          5*1000U

产品来源: 

       Rhinogen® EndoS endoglycosidase是利用重组E. coli表达系统重组表达生产并经过多步层析纯化得到的重组EndoS糖苷内切酶,分子量大小约为92kDa。

产品质量:

       SDS-PAGE分析,纯度≥90%。

产品特性:

       最适反应pH 为6.0~8.0;最适反应温度37℃。

酶活定义:

       1个酶活力单位定义:37°C条件下,30分钟内酶切≥95% 1μg重组单克隆IgG所需要的酶量。

保藏条件:

       采用冰袋或干冰运输,收到产品后请立即将其置于-30℃至-10℃冻存;避免反复多次冻融。

应用:

       去糖基化以除去Fc聚糖异质性;抗体糖工程改造;IgG糖型分析。

使用建议:

       1. 使用前,请将Rhinogen® EndoS endoglycosidase取出,10000rpm离心10秒,确保所有酶液都在管底;
       2. 在消化缓冲液中加入所需量的IgG(建议IgG浓度在0.5~10mg/ml);
       注意:建议消化缓冲液为10mM sodium phosphate, 150mM NaCl, pH 7.4;
       3. 将Rhinogen® EndoS endoglycosidase加入至IgG样品中;
       注意:每1μg IgG加1 unit EndoS糖苷酶进行消化;例如,加入1μl(40 units)EndoS溶液以酶切40μg的IgG;
       4. 在37℃条件下孵育30分钟。

操作说明:

       本产品仅供研究使用,不适用于人或动物的诊断及治疗用途。

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