背景：

       岩藻糖是许多寡糖（O或N-连）和多糖结构以及糖蛋白和糖脂的重要组成部分，它们通常与各种生物事件有关，包括受精、胚胎发生、细胞凋亡、信号转导和疾病进展，如类风湿性关节炎、炎症、癌症及囊性纤维化。糖缀合物的去岩藻糖基化是了解糖缀合物生物学效应的重要过程。

       α1-2岩藻糖苷酶是一种高度特异性的外糖苷酶，它催化从低聚糖中水解线性α1-2连接的l -岩藻糖基（线性底物被定义为相邻的残基上没有分支）。

       Rhinogen^® α1-2 Fucosidase是利用大肠杆菌系统表达并经过多步层析纯化得到的重组糖苷酶，分子量大小约为97.7kD。中性条件具有活性，在37℃下获得最佳反应活性。根据消化底物不同可适当延长反应时间。

产品包装：

       Rhinogen^® α1-2 Fucosidase（α 1-2岩藻糖苷酶）包装规格如下：

配套试剂:

产品来源:

       重组表达于E. coli，理论分子量约97.7KD，C端带6×His标签。

产品质量：

       SDS-PAGE分析，纯度≥95%；没有检测到污染的外切糖苷酶、糖苷内切酶及蛋白酶活性。

产品特性：

       α1-2 岩藻糖苷酶是一种高度特异性的外切糖苷酶，可催化水解糖蛋白或游离寡糖上α1-2 连接的岩藻糖。

酶活定义：

       在 20 mM Tris pH 6.8 中在 37℃下孵育 30 分钟，一个单位的 Rhinogen^® α 1-2 Fucosidase可从≥90% 的 11 nmol 2'-fucosyllactose中水解岩藻糖。

保藏条件：

       1. 采用冰袋运输， 收到产品后请立即将酶置于-20℃；配套试剂置于-20℃储存。
       2. 本品不含防腐剂，务必确保无菌操作取用，避免污染。

应用：

       1. 聚糖结构分析；
       2. 治疗性重组蛋白的表征及质量控制；
       3. 消除糖蛋白的异质性。

特性：

       Rhinogen^® α1-2 Fucosidase是一种高度纯化和非常稳定的外切糖苷酶，具有稳定性高、与下游检测兼容等特点。
       1. 高纯度：没有污染蛋白酶/其它糖苷酶，纯度≥95％；
       2. 高稳定性：每批产品都经过严格的质量控制，以实现产品批间稳定性；
       3. 与下游 HPLC、质谱兼容：不含甘油，酶切体系与 HPLC 及质谱工作流程环境兼容。

推荐使用方法：

       1. 取1µg糖蛋白或者100nM寡糖样品，加纯化水至反应体系为9μl；
       2. 加入1µl 10×Glyco缓冲液3；
       3. 加入1-2 µl Rhinogen^® α1-2 Fucosidase，轻柔混匀；
       4. 37°C 条件下反应1小时。
       注意：根据底物类型适当优化酶的浓度和孵育时间。

操作说明：

       1. 对于不同的糖蛋白样品，需要实验摸索最适的酶浓度及反应时间；
       2. 反应可以线性放大或缩小；
       3. 对于不同的糖蛋白样品，所需酶量需要进行适当优化或根据经验确定最优的操作方法。在10~25μl反应体系中，对于1μg糖蛋白建议初始酶量1~2μl，反应1小时，如果没有完全消化，建议过夜处理。

注意事项：

       本产品仅供研究使用，不适用于人或动物的诊断及治疗用途。